肠炎沙门菌Ybj X基因缺失株的构建及生物学特性研究
李永慧1, 2 , 苏硕青1 , 吴同垒1 , 王洪彬1 , 孔庆山1, 2 , 赵飞2 , 史秋梅1 , 张志强1
1.河北科技师范学院,秦皇岛 066004; 2.秦皇岛第二医院,昌黎 066600
Construction and characterization of a Ybj X-deficient mutant of Salmonella enteritidis C50336 strain
LI Yong-hui1, 2 , SU Shuo-qing1 , WU Tong-lei1 , KONG Qing-shan2 , ZHAO Fei2 , SHI Qiu-mei1 , ZHANG Zhi-qiang1
1. Hebei Normal University of Science &Technology, Qinhuangdao 066600, China; 2. The second hospital of Qinhuangdao, Qinhuangdao 066600, China
摘要 为研究肠炎沙门菌外膜蛋白Ybj X对该菌致病作用的影响,本研究利用 λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌(C50336)Ybj X基因缺失突变株(C50336ΔYbj X),并对其生物学特性进行分析,探究Ybj X蛋白在肠炎沙门菌致病过程中的作用。结果显示,缺失株C50336ΔYbj X与野生型菌株和回复菌株相比,其生长速度、生化特性无明显差异,但其在血清中和蛋清中的存活能力明显下降。此外,药敏试验结果表明Ybj X基因缺失会引起沙门菌药物敏感性增强。进一步的,动物致病性实验表明,Ybj X基因缺失会引起沙门菌毒力和巨噬细胞内存活能力的严重下降。本研究证实Ybj X基因与肠炎沙门菌毒力密切相关,为进一步阐释肠炎沙门菌感染致病机制奠定基础。
关键词 :
肠炎沙门菌 ,
基因缺失 ,
Ybj X基因 ,
生物学特性
Abstract :To investigate the role of outer membrane protein Ybj X in Salmonella enteritidis infection, we generated a Ybj X-knockout mutant by λ-Red homologous recombination, and examined the growth characteristics, biochemical characteristics, antibiotic-resistance and virulence of Ybj X deleted mutant. The data showed that, the Ybj X-knockout didn’t affect the growth characteristics and biochemical characteristics C50336 strains. But compared to the wild type and complemented strains, the Ybj X-deficient mutant displayed sharply impaired survival in chicken and egg albumen. Sensitivity to Polymyxin B and some other antibiotics were significantly increased. The apparently attenuated virulence and impaired survival in macrophage were also observed in Ybj X-deleted mutant. This study determined the close relationship of Ybj X and Salmonella ’s virulence and provided insight into the underlying mechanism of Salmonella caused infection.
Key words :
Salmonella enteritidis
knockout
Ybj X gene
biological characteristics
收稿日期: 2018-05-29
基金资助: 国家自然科学基金项目(No.31802186),河北省高等学校科学技术研究项目(No.ZD2016067),秦皇岛市科技创新平台建设运行经费(No.201702B001),秦皇岛市科技局项目(No.201602A185),河北省燕山产业技术研究院项目肉鸡方向
通讯作者:
史秋梅,Email:shiqiumei@126.com,ORCID: 0000-0002-4791-6943;张志强,Email:wszhangzhiqiang@yeah.net,ORCID: 0000-0003-3332-3212
引用本文:
李永慧, 苏硕青, 吴同垒, 王洪彬, 孔庆山, 赵飞, 史秋梅, 张志强. 肠炎沙门菌Ybj X基因缺失株的构建及生物学特性研究[J]. 中国人兽共患病学报, 2019, 35(4): 324-329.
LI Yong-hui, SU Shuo-qing, WU Tong-lei, KONG Qing-shan, ZHAO Fei, SHI Qiu-mei, ZHANG Zhi-qiang. Construction and characterization of a Ybj X-deficient mutant of Salmonella enteritidis C50336 strain. Chinese Journal of Zoonoses, 2019, 35(4): 324-329.
链接本文:
http://www.rsghb.cn/CN/10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.031 或 http://www.rsghb.cn/CN/Y2019/V35/I4/324
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