旋毛虫抗原模拟表位抗原性的鉴定
潘虹,姜昌富,李天群,时红波,朱晓华,雷家慧,魏兰英
华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医学院病原生物学系 武汉430030
,武汉430030
,武汉430030
,武汉430030
,武汉430030
,武汉430030
,武汉430030
Identification of the mimic epitope antigenicity of Trichinella spiralis
摘要 目的 鉴定旋毛虫十二肽模拟表位的抗原性。方法 筛选噬菌体十二肽库获得旋毛虫抗原模拟表位 ,随机挑选2 4个克隆 ,利用酶联免疫吸附试验 (ELISA)选取灵敏性较好的 6个克隆 (T1~T6 ) ,检测其敏感性和特异性。结果 6个克隆均与旋毛虫病患者血清反应 (10 0 % ) ;其中T6克隆特异性最好 ,无交叉反应 ;其余克隆与卫氏并殖吸虫和日本血吸虫病患者血清存在不同程度的交叉反应 (0 %~ 4 0 % )。结论 用噬菌体十二肽库筛选得到的旋毛虫抗原模拟表位具有较好的灵敏性和特异性 ,作为新的旋毛虫病诊断试剂有较好的应用前景。
关键词 :
旋毛形线虫 ,
旋毛虫病 ,
噬菌体肽库
Abstract :To identify the antigenicity of the 12-mer peptide mimic epitope of Trichinella spiralis,the mimic epitopes of this organism were obtained by screening the phage 12-mer peptide library,24 blue plaques were picked out randomly,and 6 clones (T1 T6) with high sensitivity were selected by ELISA.It was found that these 6 clones all reacted with the sera of patients with trichinosis (100%),in which the T6 clone showed best specificity without any cross reaction.The other clones cross reacted to certain degree with the sera of patients with paragonimiasis or schistomikasis(0% 40%).It concludes that the mimic epitopes of Trichinella spiralis selected from phage 12-mer.
Key words :
Trichinella spiralis
trichinosis
phage peptide library
mimic epitope
收稿日期: 2004-04-20
〔1〕朱兴全,龚广学,薛富汉,等旋毛虫病〔M〕郑州:河南科学技术出版社,1993169~192
〔2〕AppletonJA ,Bellrg,HomanW ,etalConsensusonThichinellaspi ralisantigensandantibodies〔J〕ParasitolToday,1991,7:190
〔3〕Ortega-PierresG ,Yepez-muliaL ,Homanw,etalWorkshoponadetailedcharacterizationofTrichinellaspiralisantigen;aplatfomeforfuturestudiesonantigensandantibodiestothisparasite〔J〕ParasiteImmunol,1996,18:273
〔4〕KehayovIR ,KyurkchievSD ,TankovCV ,etalTrichinellaspiralis:a76kDaexcretory/secretorylarvalantigenidentifiedbymonoclonalantibody〔J〕ExpParasitol,1991,73:150
〔5〕宋思扬,郑忠辉,黄耀坚,等旋毛虫排泄分泌抗原p49基因的克隆〔J〕厦门大学学报自然科学版,1999,38(1):117
〔6〕ScottJK ,SmithGP Searchingforpeptideligandswithanepitopeli brary〔J〕Science,1990,249:386-390
〔7〕DybwardA ,BogenB ,NatvigJB ,etalPeptidephagelibrariescanbeanefficienttoolforidentifyingantibodyligandsforpolyclonalantis era〔J〕ClinExpImmunol,1995,102:438-442
〔8〕GrothausMC ,SrivastavaN ,SmithsonSL ,etalSelectionofanim munogenicpeptidemimicofthecapsularpolysaccharideofNeisseriameningitidesserogroupAusingapeptidedisplaylibrary〔J〕Vac cine,2000,18:1253-1263
〔9〕PincusSH ,SmithMJ ,JenningsHJ ,etalPeptidesthatmimicthegroupBstreptococcaltypeⅢcapsularpolysaccharideantigen〔J〕JImmunol1998,160:293-298
[1]
翟铖铖, 陈家旭, 陈韶红, 吴秀萍. 全球人体旋毛虫病的暴发情况分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 2017, 33(11): 1018-1023.
[2]
文慧, 胡晨曦, 王李昂, 王涵, 刘春颖, 宋艳艳, 刘若丹, 姜鹏, 王中全, 崔晶. 旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原诊断早期旋毛虫病的研究 [J]. 中国人兽共患病学报, 2016, 32(12): 1058-1063.
[3]
李润花 赵文婧 裴彦江 李起超 殷国荣. 口服阿苯达唑三种不同溶液抗小鼠旋毛虫成囊期幼虫的效果观察 [J]. 中国人兽共患病学报, 2012, 28(6): 640-643.
[4]
李润花 高晋华 裴彦江 李起超 申金雁 殷国荣. 口服三苯双脒不同疗程抗小鼠旋毛虫囊包幼虫的效果观察 [J]. 中国人兽共患病学报, 2011, 27(7): 620-624.
[5]
许汴利;杜尊伟;赵旭东;汪丽波;李辉;董莹;苏云普;姜进勇;蔺西萌;王学忠;. 我国部分省市旋毛虫病的血清学调查研究 [J]. 中国人兽共患病学报, 2009, 25(10): 1021-1024.
[6]
秦银霞;崔晶;王中全;. 免疫层析试纸条诊断旋毛虫病的研究 [J]. 中国人兽共患病学报, 2007, 23(09): 866-868.
[7]
李辉,许汴利,赵旭东,邓艳,蔺西萌. 夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原的研究(英文) [J]. 中国人兽共患病学报, 2005, 21(09): 769-775.
[8]
李天群,雷家慧,姜昌富. 囊虫抗原模拟表位的筛选和序列分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 2004, 20(11): 968-970.
[9]
蔡海松;宋思扬;张伟光;黄耀坚;林新坚;郑忠辉;苏文金;. 旋毛虫病p49抗原相关抗体的ELISA检测 [J]. 中国人兽共患病学报, 2001, 17(01): 45-47.
[10]
刘光明,宋思扬,乔玉欢,蔡海松,张伟光,苏文金. 旋毛虫p49抗原基因原核表达产物的纯化 [J]. 中国人兽共患病学报, 1999, 15(03): 24-26.
[11]
崔昱,程晓馨,王莹. 旋毛虫病鼠多脏器氧化损伤与毒血症形成关系的探讨 [J]. 中国人兽共患病学报, 1998, 14(06): 38-41.
[12]
崔晶,王中全,晋雪香,武峰. 郑州市一起旋毛虫病大暴发的流行病学调查及临床观察 [J]. 中国人兽共患病学报, 1997, 13(02): 65-67.
[13]
王中全,崔晶,毛福荣,晋雪香,武峰. 旋毛虫病人治疗后血清抗体水平的变化 [J]. 中国人兽共患病学报, 1995, 11(05): 0-0.
[14]
朱兴全,史晓红,窦兰清,孙学勤,牛炳亨,石磊,杨书军. 旋毛虫成虫可溶性粗抗原对小鼠的免疫保护作用 [J]. 中国人兽共患病学报, 1992, 8(05): 17-19.
[15]
黎世涛,王秀珍,屈振麟,魏继炳,张显发. 快速诊断人畜旋毛虫病ELISA试剂盒的研制及应用 [J]. 中国人兽共患病学报, 1991, 7(03): 23-25.