支原体通用PCR引物的设计及在诊断的应用
尹秋生,马立人,王北宁
北京军区总医院!北京,100700,军事医学科学院,北京军区总医院!北京,100700
DESIGN OF UNIVERSAL PRIMERS FOR THE PCR DETECTION OF MYCOPLASMA AND THEIR CLINICAL APPLICATION
摘要 目的 快速全面检测感染人体、动物和细胞培养的多种常见支原体。方法 从 12种支原体的 16S与 2 3SrRNA核酸序列中选择了两段高度保守的核酸序列 ,作为支原体通用引物 ,一次PCR扩增就能检测出 12种支原体。结果 用这对通用引物检测了 41份临床标本 ,16份细胞培养物和 2 0只大白鼠 ,阳性率分别为 14 6 %、 43 7%和 2 0 0 %。结论 用通用引物检测支原体具有覆盖面广、检测种数多、不易发生漏检等优点。
关键词 :
支原体通用引物 ,
支原体 ,
临床标本 ,
细胞培养物
Abstract :In order to detect Mycoplasma species mainly infected in human,animal and cell cultures,Universal PCR primers were designed according to the published sequences of 16s and 23s rRNA of Mycoplasma、More than ten culture of different Mycoplasma species were detected by PCR with the universal primers Resulted in the designed profiles in electrophoresis,41 Vagiuna-Swab samples,30 wistars and 16 cell cultures were also 14 6%、20 0% and 43 7% respectively,It showed the positive PCR detection of Mycoplasma with universal primers could be a helpful way in laboratory and clinical
Key words :
Universal primers
Mycoplasma PCR
Clinical samples
Cell cultures
收稿日期: 2000-03-20
1 GnarpeH FribergJ Mycoplasmaandhumanreproductivefailure〔J〕 AmJObstetGynecol,1972 ,114∶72 7
2 朱云霞 ,吴志君 女性生殖道炎症者CT ,UU套式PCR检测分析〔J〕 中国优生与遗传杂志 ,1996 ,4(6 )∶17
3 M Abele-Horm ,C Wolff,P Dressel,etal PolymerasechainRe actionversusCultureforDetectionofUreaplasmaurealyticumandMycoplasmahominisintheUrogenitalTractofAdultsandtheRespi ratoryTractofNewborns〔J〕 EurJClinMicrobiolInfectDis,1996 ,15∶5 95
4 RemiKovacic,ValerieLaunay ,PhilippeTuppin,etal SearchforthepresenceofsixMycoplasmaSpeciesinperipheralBloodMononu clearCellsofSubjectsSeropositiveandSeronegativeforHumanIm munodeficiencyVirus〔J〕 JCM ,1996 ,34 (7)∶180 8
5 TUemori,KAsada,IkunoshinKato,etal Amplificationofthe 16s- 2 3sspacerRegioninrRNAOperonsofMycoplasmasbythepoly merasechainReaction〔J〕 SystemApplMicrobiol,1992 ,15 (1)∶181
6 CeXiyui.InvivoEliminatimofmycoplasma [R].Iccc -V2letter,1992 ,p36
7 Kari-ErikJohnsson,GoranBolke EvaluationandpracticalaspectsofuseacommercalDNAprobefordetectionofmycoplasmainfectionincellcalture〔J〕 .JBiochmicalandBiophysicalMethods,1989,19(2 )∶185
[1]
倪珊珊, 薛冠华, 李少丽, 闫超, 孙红妹. 肺炎支原体黏附细胞器的结构与功能 [J]. 中国人兽共患病学报, 2019, 35(9): 831-836.
[2]
吴倩,吴起武,张海龙,杨文文,莫壮斌,边晓锋,洪超畅,李坤教. 五指山地区儿童肺炎支原体感染流行特点及与气候因素相关性研究 [J]. 中国人兽共患病学报, 2019, 35(7): 667-671.
[3]
王朝, 王维, 郭伟, 吕玲, 李维超, 李会强, 林书祥. 基于RNA恒温扩增技术分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体感染的流行病学特点 [J]. 中国人兽共患病学报, 2019, 35(3): 223-228.
[4]
甘龙杰, 林宇岚, 陈守涛, 余罗莉, 杨滨. 育龄女性社区获得性生殖道支原体感染及耐药分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 2019, 35(3): 278-280.
[5]
倪珊珊, 孙红妹. 肺炎支原体对大环内酯类抗生素耐药机制的研究近况 [J]. 中国人兽共患病学报, 2018, 34(8): 743-747.
[6]
常青, 高燕敏, 闫超, 俞蓉, 张璠, 刘炜, 孙红妹. 2015-2016年无锡地区儿童肺炎支原体流行基因特征分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 2018, 34(7): 668-672.
[7]
李青曌, 史文元, 陈虹亮. 肺炎支原体的实验室检测技术研究进展 [J]. 中国人兽共患病学报, 2017, 33(9): 841-844.
[8]
刘宝山, 赵芝娜, 赵雨杰, 王桂珍. 肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表达及鉴定 [J]. 中国人兽共患病学报, 2017, 33(7): 588-591.
[9]
洪翔, 殷玥琪, 连大帅, 杨曼, 王蓓. 支原体感染与生殖系统肿瘤关联性研究的系统评价 [J]. 中国人兽共患病学报, 2017, 33(12): 1082-1088.
[10]
田瑞雨, 熊祺琰, 倪博, 王佳, 韦艳娜, 冯志新, 邵国青. 1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定 [J]. 中国人兽共患病学报, 2017, 33(11): 962-966.
[11]
常青, 闫超, 俞蓉, 高燕敏, 欧阳冰, 孙红妹. 2015年春季无锡地区儿童肺炎支原体及呼吸道常见致病菌的分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 2016, 32(7): 636-640.
[12]
纪燕, 熊祺琰, 王佳, 张必雄, 倪博, 马庆红, 冯志新, 刘茂军, 邵国青. 猪鼻支原体可变脂蛋白家族重组蛋白的构建表达及黏附细胞功能检测 [J]. 中国人兽共患病学报, 2016, 32(4): 338-343.
[13]
李舟文, 肖光文, 张国雄, 徐美兰, 乔亚峰, 曾令斌. 梅州地区2010-2014年儿童肺炎支原体感染及耐药情况分析 [J]. 中国人兽共患病学报, 2016, 32(3): 306-311.
[14]
肖光文, 李舟文, 张国雄, 徐美兰, 乔亚峰, 曾令斌. 梅州地区小儿感染肺炎支原体生物群分布与耐药性差异研究 [J]. 中国人兽共患病学报, 2016, 32(10): 898-902.
[15]
刘艳, 刘丹, 朱翠明, 黄泽智, 蒙松年, 唐翠莲. 突变敏感性分子开关检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素的耐药性研究 [J]. 中国人兽共患病学报, 2015, 31(5): 479-484.