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| 布氏杆菌表面特异性多表位抗原的串联表达与免疫磁珠的初步建立 |
| 唐泰山1,赵林立2,廉慧峰3,张常印1,陈国强1,姜 焱1,祝长青1,王凯民1 |
1.江苏出入境检验检疫局,南京 210001;
2.内蒙古出入境检验检疫局,呼和浩特 010020;
3.山西出入境检验检疫局,太原 030024 |
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摘要 目的为获得布氏杆菌表面多表位抗原的特异性抗体,用于布氏杆菌免疫磁珠的构建。方法 从布氏杆菌3个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段并插入原核表达载体,转化至E. coli BL21(DE3),获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,IPTG诱导后表达出30 kDa的重组蛋白,亲和层析纯化后将其进行Western blot分析、间接ELISA鉴定和兔免疫试验,制备的抗血清经亲和层析纯化后,包被成免疫磁珠并用于布氏杆菌富集。结果 表达的重组蛋白能与牛抗布氏杆菌血清反应,其抗血清与布氏杆菌发生良好反应,纯化抗体包被的免疫磁珠能特异性吸附布氏杆菌。结论 获得的布氏杆菌特异性抗体和免疫磁珠具有良好的应用前景。
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| 关键词 ：
布氏杆菌,
多表位抗原,
串联表达,
免疫磁珠
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| 基金资助:国家质检总局科研项目(No. 2008IK004) |
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通讯作者:
张常印,Email:zhangcy@jsciq.gov.cn
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| [1] |
马晓琳,朱志翠,张迎春,吴建伟,王涛. 家蝇抗菌肽MAF-1A的串联表达与抗白念珠菌体外活性检测[J]. 中国人兽共患病学报, 2018, 34(5): 429-433. |
| [2] |
王丹, 赵世刚. 神经型布氏杆菌病的研究进展与分析[J]. 中国人兽共患病学报, 2017, 33(10): 927-932. |
| [3] |
郭惠,杨晋川,王路梅,许静静,张雷. 3种快速检测生肉中单核增生李斯特菌的方法研究[J]. 中国人兽共患病学报, 2014, 30(1): 106-107. |
| [4] |
马慧，王祎龙，胡忠义，秦莲花，陈海珍，陆俊梅，王洁，柏文娟，郭琪，高诗会，杨华. 免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌[J]. 中国人兽共患病学报, 2013, 29(5): 466-471. |
| [5] |
王涛, 刘凯, 王艳, 綦廷娜, 叶长芸, 熊衍文. 应用免疫磁珠分离法及荧光定量 PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7[J]. 中国人兽共患病学报, 2011, 27(4): 291-293. |
| [6] |
蔡一非;钟旗;伊日盖;张喜悦;王楷宬;黄保续;范伟兴;. 两奶牛场布氏杆菌分离鉴定及四种血清学检测方法比较[J]. 中国人兽共患病学报, 2009, 25(05): 456-459. |
| [7] |
孟宪梅;于师宇;李兆辉;任洪林;卢士英;任立松;柳增善;. 食物中毒菌多联融合毒素Hc-VT1B-SEA-VT2B-SEB的表达及免疫学特性研究[J]. 中国人兽共患病学报, 2007, 23(11): 1088-1092. |
| [8] |
乔军;才学鹏;孟庆玲;景志忠;张艳;贾桂珍;. 马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究[J]. 中国人兽共患病学报, 2007, 23(02): 128-131. |
| [9] |
陈伟业;王淑杰;王永;胡森;王清华;辛九庆;佟有恩;黄克和;步志高;. 重组布氏杆菌BP26蛋白和OMP31蛋白作为间接ELISA诊断抗原的研究[J]. 中国人兽共患病学报, 2006, 22(06): 518-521. |
| [10] |
翁文川;杨汝德;焦红;胡锋科;许龙岩;凌莉;. 免疫磁分离-荧光PCR应用在肉类单增李斯特氏菌的检测[J]. 中国人兽共患病学报, 2006, 22(06): 547-550. |
| [11] |
李鹏;罗德炎;高永辉;张松乐;宋艳;王希良;. 布氏杆菌BCSP_(31)/pVAX1重组表达质粒的构建及其免疫保护效果的研究[J]. 中国人兽共患病学报, 2006, 22(06): 493-497. |
| [12] |
袁燕，谷登峰，何倩倪，顾文艺，吐尔洪江. 抗牛布鲁氏菌独特型抗体在牛体中的免疫反应[J]. 中国人兽共患病学报, 1996, 12(04): 0-0. |
| [13] |
严延生,于恩庶. 用Western印迹法鉴别布氏菌和O:9型耶氏菌抗体[J]. 中国人兽共患病学报, 1988, 4(01): 10-14. |
| [14] |
洪怀民,张旭中,脱长宇,赵广才,韩延昌,樊仲规,姚琳,周珍,赵玉芳,杨应文. 豚鼠实验性布氏杆菌病的肉芽肿及有关病变[J]. 中国人兽共患病学报, 1988, 4(01): 27-29. |
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2013, Vol. 29 
