%A 郑峰, 刘鹏, 蔡炳冈, 朱进, 潘秀珍, 王长军
%T 2型猪链球菌Rgg调控因子的序列结构分析及原核表达
%0 Journal Article
%D 2016
%J 中国人兽共患病学报
%R 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.004
%P 229-233
%V 32
%N 3
%U {http://www.rsghb.cn/CN/abstract/article_23635.shtml}
%8 2016-03-30
%X 目的 克隆2 型猪链球菌Rgg转录调控因子编码基因并进行原核表达和纯化,并对其进行生物信息学分析和结构预测.方法 PCR扩增2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组的rgg基因,构建重组表达质粒pQE30-rgg,转化大肠杆菌M15,筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE 鉴定表达产物;确定最佳诱导条件后,大量培养诱导重组表达菌,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,非变性PAGE电泳分析其体外聚合状态.结果 整个Rgg蛋白由15个α螺旋和2个β转角组成;构建的重组质粒在宿主菌中可高效表达,15 ℃过夜诱导获得可溶性重组蛋白的比例最高;获得了较高纯度的Rgg重组蛋白,并证实其在体外可形成同源二聚体.结论 成功地原核表达并纯化了Rgg重组蛋白,证明它存在二聚体结构,为进一步研究其调控机制奠定了基础.