中国人兽共患病学报
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中国人兽共患病学报
 
2013年 29卷 6期
刊出日期:2013-06-20

论著
实验研究
综述
调查防治
EID论文摘译
   
EID论文摘译
0 张炎华
美国《Emerging infectious diseases》2013年第4期有关人兽共患病论文摘译
美国《Emerging infectious diseases》2013年第4期有关人兽共患病论文摘译 P534  在患脉管炎和出血性疾病狗组织中分离出圆环病毒//Linlin Li, Sabrina McGraw, Kevin Zhu,等研究人员研究了一种新型犬圆环病毒(DogCV)的全基因组特征,该病毒分离自患有严重出血性胃肠炎、血管炎和肉芽肿性淋巴炎的狗肝脏组织。通过PCR检测不同群体狗中DogCV,腹泻粪便标本中检出率为19/168 (11.3%),健康狗粪便标本检出率为14/204 (6.9%),而来自血小板减少症、嗜中性粒细胞减少、不明原因发热或既往有蜱虫叮咬的狗血液中检出率为19/409 (3.3%)。DogCV阳性且患有腹泻的狗中有13/19 (68%)检测出其它犬类病原体的混合感染。不同狗中DogCV衣壳蛋白差异达8%。原位杂交和透射电镜检测到在4只血管危象和组织细胞炎症的狗淋巴结和脾脏中DogCV。狗组织中圆环病毒的检出扩大了已知的圆环病毒对第二哺乳动物宿主的嗜性范围。结果表明,无论是单独感染DogCV还是与其它病原体混合感染,都可能导致狗发病和死亡。 图1 DogCV原位杂交分析阳性的监测犬(犬1)和其它两只犬(犬2和犬3)的器官组织。A) 犬1消化系统外观。胃、肠浆膜可见多灶性聚结性出血。B) 犬2肾脏肉眼观。肾皮质内以及自髓质肾乳头到肾腔的部位可见局灶性出血伴坏死(梗塞)。C) 犬1回肠的HE染色。Peyer氏斑有所减少,小肠壁的肌层可见多灶性出血区域。D) 犬1回肠的原位杂交分析。Peyer氏斑周围含大量DogCV DNA。E) 犬1回肠中Peyer氏斑的HE染色,图中所示为生发中心和滤泡周围基质中的淋巴细胞减少、巨噬细胞增多。F) 犬1回肠中Peyer氏斑的原位杂交分析。大量的淋巴滤泡周围细胞胞质中含有丰富的DogCV DNA,个别细胞分散在生发中心、淋巴管以及黏膜下层。这些DogCV阳性的细胞具有巨噬细胞的形态学特征。G) 犬3空肠的HE染色,图示为动脉中部分环形纤维样坏死。H) 犬2肠系膜淋巴结的原位杂交分析。髓质淋巴窦和淋巴索中的巨噬细胞含有丰富的DogCV DNA。     P542  新型蚊子监测和控制系统的成本效益分析,巴西//Kim M. Pepin, Cecilia Marques-Toledo, Luciano Scherer,等在西半球国家中,登革热给巴西带来巨大经济损失。我们对一种新型媒介监测和控制系统--智能登革热监视系统(MID)进行了成本效益评估,该系统已经被应用在巴西米纳斯吉拉斯州的21个城市,每个城市中按300米间隔设置成年雌蚊诱捕装置。在使用MID的城市中,特别对高风险的地点(通过MID的每日更新来显示)进行媒介控制。在对照城市中,媒介控制按照巴西政府的指导方针来进行。我们估计MID系统防止了27191例登革热的发生,每个被预防的病例平均节省了227美元(中位数为58美元),大约每年节省了364517美元的直接成本(卫生保健和媒介控制)和7138940美元的工资损失(社会效益)。MID在经济实力强大的城市中更有效,在蚊子侵扰程度高的城市中更合算。   P559  戊肝病毒从兔子到食蟹猴的传播//Peng Liu, Qiu-Ning Bu, Ling Wang,等最近在中国和美国的兔子中发现了戊肝病毒(HEV),表明兔子是另一种值得注意的HEV宿主。然而,来源于兔子的戊肝病毒是否能感染人还不清楚。为了研究兔HEV人兽共患的可能性和致病机制,我们用中国的兔子HEV分离株感染两只食蟹猴和两只兔子。两只食蟹猴都发生了典型的肝炎,表现为肝脏酶活性升高、病毒血症、粪便标本中有病毒排出以及血清阳转。全基因组序列比较表明经食蟹猴传代的HEV和接种物中HEV的核苷酸同源性为99.8%。实验感染兔子的多种组织中能够检测到兔HEV-RNA(正链和负链),表明HEV可能普遍存在肝外复制。因此,HEV可以从兔子传播到食蟹猴,提示兔子可能是人类HEV感染的新来源。 P574  儿童呼吸道感染临床样品中1型博卡病毒剪切mRNA的检测//Andreas Christensen, Henrik Døllner, Lars Høsøien Skanke,等 1型博卡病毒(HBoV1)是一种与儿童呼吸道感染有关的细小病毒,但它们之间的因果关系尚未被确认。为了建立定性的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来检测HBoV1中的剪切mRNA,确定HBoV1-mRNA是否比HBoV1-DNA与呼吸道感染的关系更密切,我们利用儿童的标本来评估,这些标本既有呼吸道感染患者,也有非呼吸道感染患者,但HBoV1的DNA均为阳性。我们建立了一个针对两个交替剪切mRNA区域的实时荧光RT-PCR体系。133例呼吸道感染儿童的鼻咽抽提物中,有33份(25%)标本被检出HBoV1 mRNA,但28份对照标本中未检测到HBoV1 mRNA(P<0.001)。该实验的灵敏度和特异度好。我们的数据支持了HBoV1可能导致呼吸道感染的假设,同时,我们建议利用HBoV1 mRNA来替代HBoV1 DNA作为诊断靶标。   P581  流感病毒发生重配热点的预测// Trevon L. Fuller, Marius Gilbert, Vincent Martin,等 1957年和1968年的流感大流行都是由于病毒重配引起的,两次流行均导致约一百万人死亡。人流感病毒和家养动物中流感病毒能够发生重配并导致新的大流行。为了确定哪些地方的农业生产系统有利于病毒重组,我们采用一个多元回归模型对中国和埃及的禽类中H5N1亚型流感病毒和人类H3N2亚型病毒的监测数据进行分析。然后我们将这个模型推广到亚洲和埃及,预测人类H3N2病毒和禽H5N1病毒在哪里发生重叠,这种重叠为混合感染和发生体内重配提供了场所。对于亚洲来说,我们进一步确定猪群密度高的地区更容易发生重配。病毒发生重配的可能地点集中在包括亚洲的印度北部平原、中国沿海和中部省份、朝鲜半岛西部和日本西南部,以及埃及的尼罗河三角洲。 P630  2008年突尼斯猫科轮状病毒毒株的来源// Mouna Ben Hadj Fredj, Elisabeth Heylen, Mark Zeller,等 2008年,从突尼斯一位儿童检测到一种在人类罕见的G6P[9]轮状病毒RVA/human-wt/TUN/17237/2008/G6P[9]。为了确定该毒株的来源,我们进行了系统进化分析并发现了一个独特的基因型组合,该基因型组合属于猫科轮状病毒BA222样基因型组合。这份毒株很可能是由猫直接传播到人。 P635  2011年奥地利马中的蜱传脑炎病毒// James O. Rushton, Sylvie Lecollinet,Zdenek Hubálek,等在奥地利的3个联邦州中,蜱传脑炎病毒的感染率在一群有257只相同品种的马中出乎意料的高(26.1%)。幼龄(p<0.001)和雄性(p=0.001)与感染显著相关。   P638  长指蝙蝠中的肝炎病毒,缅甸// Biao He, Quanshui Fan, Fanli Yang,等在对来自缅甸蝙蝠中的病毒组进行分析时发现,大量序列均注释为正嗜肝DNA病毒。我们报告了这种存在于蝙蝠的正嗜肝DNA病毒的基因组序列和形态学分析。这种病毒不同于目前已知正嗜肝DNA病毒属中任何成员,表明是一新种属。   P641  2012年泰国柯萨奇A6病毒引起的手足口病// Jiratchaya Puenpa, Thaweesak Chieochansin, Piyada Linsuwanon,等在泰国,手足口病通常由EV71或COX.A16病毒引起。为了确定2012年6月到8月期间泰国手足口病大爆发的原因,我们检测了从病人中采集的标本。COX.A6病毒是此次的病原体。为了提高预防与控制能力,应对手足口病的病原进行监测。(福建省疾病预防控制中心   张炎华  译,张拥军  校)
2013 Vol. 29 (6): 0- [摘要] ( 580 ) [HTML 1KB] [PDF 1776KB] ( 914 )
论著
527 章域震 张海林 杨卫红 冯云
巴泰病毒云南株生物学性状研究
摘要: 目的 掌握巴泰(Batai)病毒生物学特性,为巴泰病毒的监测和调查研究提供科学依据。方法 用分离自云南省菲律宾按蚊(Anopheles philippinensis)的巴泰病毒LC92-4株,采用细胞培养、小白鼠感染、血凝抑制、间接免疫荧光、空斑试验以及病理检测和电镜观察等方法进行生物学特性试验。结果 巴泰病毒可引起<4周龄小白鼠发病死亡。感染鼠脑病毒颅内、皮下和腹腔接种2周龄小白鼠的LD50分别为5.67logLD50/0.025mL、5.3logLD50/0.03mL和4.5logLD50/0.03mL。感染病毒鼠的心、肝、脾、肺、肾病毒悬液颅内接种2周龄小白鼠,LD50分别为3.75、4.25、2.25、3.0、2.25 logLD50/0.025mL。感染发病小白鼠脑、心、肝、脾、肺、肾均发现病理改变。感染鼠的脑组织经电镜检测发现圆形有包膜病毒颗粒,大小约82nm。巴泰病毒能在BHK21和Vero细胞产生明显病变,并可产生空斑;在BHK21细胞上,空斑滴度为6.04logPFU/mL;在C6/36细胞上不产生病变。感染病毒鼠脑接种BHK21和Vero细胞,TCID50分别为 5.50logTCID50/0.025mL和5.00 logTCID50/0.025mL。在pH5.75~7.0条件下,巴泰病毒不具有与鸽、鹅、鸡、鸭、人O型和绵羊红血球发生凝集的特性;空斑减少中和试验检测云南省357份人血清,阳性2份,中和抗体滴度均为1:10。结论 乳小白鼠和幼年小白鼠对巴泰病毒高度易感。BHK21和Vero细胞对巴泰病毒敏感,可用于病毒分离培养和空斑测定。建立的免疫荧光和空斑减少中和试验具有特异性,可用于巴泰病毒抗体检测。应进一步开展该病毒的分布及其与疾病关系的研究。
2013 Vol. 29 (6): 527-532 [摘要] ( 721 ) [HTML 0KB] [PDF 1080KB] ( 1026 )
533 王炜 任伟宏
天蚕素多肽分子对大肠埃希菌的抑制作用
目的 体外重组表达家蝇天蚕素成熟肽分子,观察其对临床分离的多重耐药大肠埃希菌(E.coli)体外抑制作用。方法 PCR克隆天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)基因,在MC基因前加入色氨酸密码子(TGG)连接于pET32a质粒的硫氧还蛋白基因后,构建重组质粒pET32a-MC。转化E.coli/BL21(DE3)中。IPTG诱导重组融合蛋白质Thioredoxin(硫氧还蛋白,Trx)-MC表达。融合蛋白质纯化后,经胃蛋白酶37℃水解。融合蛋白质中的天蚕素氨基酸序列具有抗胃蛋白酶能力不被水解,融合蛋白质其余部分被胃蛋白酶水解成小于2kD的碎片,使用透析袋分离、纯化、浓缩,获得天蚕素成熟肽分子。水解产物经Tricine-SDS-PAGE验证,获得一条与天蚕素分子大小相近的条带。采用液态生长抑制试验检验天蚕素分子对E.coli抑制作用,观察其对标准菌株ATCC 25922及临床分离多重耐药菌株的抑制活性。结果 MC成熟肽分子体外对E.coli标准菌株的抑制活性较强,标准菌株较多重耐药菌株受抑制得更快,但两者均能被天蚕素分子抑制。结论 天蚕素多肽分子对E.coli多重耐药菌株具有抑制作用。
2013 Vol. 29 (6): 533-536 [摘要] ( 731 ) [HTML 0KB] [PDF 707KB] ( 1119 )
537 彭微 汪世平
日本血吸虫pVAX1/SjRPS4?CB多价疫苗免疫对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成中TNF-α表达的影响
目的 观察血吸虫pVAX1/SjRPS4?CB多价疫苗对小鼠肝脏虫卵肉芽肿中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α;TNF-α)表达的影响。 方法 55只昆明小鼠随机均分为pVAX1/空质粒组、pVAX1/SjRPS4组、pVAX1/SjCB组、pVAX1/SjRPS4?CB组和PBS对照组,各组小鼠分别于左腿股四头肌注射100 μg 相应重组质粒,PBS组注射100 μl PBS。每隔2周加强免疫1次,共3次。末次免疫后2周每鼠经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴[(20±1)条]。感染后6周剖杀小鼠,分离肝脏,运用免疫组化和原位杂交法检测TNF-α蛋白和TNF-α mRNA的表达情况。 结果 多价疫苗pVAX1/SjRPS4?CB组TNF-α mRNA和蛋白在肝虫卵肉芽肿中的染色评分得分(9.00±2.17,9.13±2.33),均明显高于pVAX1/SjCB组(6.33±3.06,9.13±2.33),pVAX1/SjRPS4(6.00±3.30,6.53±2.50)单价疫苗组和pVAX1空质粒组(0.67±0.72,0.93±0.59)以及PBS(0.00±0.00,0.00±0.00),P<0.05。 结论 多价疫苗pVAX1/SjRPS4?CB组TNF-α mRNA和蛋白信号呈棕黄色、棕褐色,主要位于肝脏虫卵肉芽肿周围。以强阳性表达为主。TNF-α表达上调可能是pVAX1/SjRPS4?CB多价疫苗免疫机制之一,能加强宿主的Th1型免疫反应,产生比单价疫苗更好的免疫效果。
2013 Vol. 29 (6): 537-542 [摘要] ( 753 ) [HTML 0KB] [PDF 771KB] ( 1158 )
543 翁育伟 张拥军 谢剑锋 黄萌 陈炜 张炎华 何文祥 吴冰珊 王金章 郑奎城 严延生
福建省首例人感染H7N9禽流感病例实验室诊断和病毒序列分析
摘要 目的 应用real-time RT-PCR和病毒序列测定等方法对福建省首例人感染H7N9禽流感病例开展实验室诊断。方法 采集人感染H7N9禽流感病例呼吸道标本并提取RNA,分别采用甲乙型流感通用引物和探针、季节性流感(包括H3N2、H1N1、H1N1pdm)特异性引物和探针以及H7N9特异性引物和探针进行荧光PCR检测。利用自行设计的引物扩增病毒基因组节段,测定并分析病毒基因组序列。结果 real-time RT-PCR结果表明,应用甲型通用引物扩增结果阳性,乙型及季节性流感(包括H3N2、H1N1以及H1N1pdm)扩增结果均为阴性,特异性H7N9亚型流感病毒扩增结果阳性。序列测定获得的病毒4个节段的序列与已公布的人感染H7N9禽流感病毒序列高度一致。结论 病例呼吸道标本中存在人感染H7N9禽流感病毒,病毒的基因与近期国内流行的人感染H7N9禽流感病毒高度类似。
2013 Vol. 29 (6): 543-546 [摘要] ( 632 ) [HTML 0KB] [PDF 695KB] ( 1199 )
实验研究
547 苏良 欧新华
猪链球菌长沙分离株的鉴定与16S rRNA系统进化分析
猪链球菌(Streptococcus suis,Ss)是链球菌的一种,也是一种重要的人兽共患病原菌,可引起严重的人兽共患传染病。Ss根据荚膜抗原特性的不同共分为35个血清型; 其中2型流行最广,是致病力最强的一种[1],1968年丹麦首次报道了3例人感染Ss导致脑膜炎并发败血症病例[2],到2007年,全球已报道超过409例人感染Ss病例[3]。病例报道较多地域均是生猪养殖加工业发达或有食用猪肉习惯的国家或地区,且呈现高度散发态势[4]。在国内1998年江苏省猪群爆发Ss疫情,并首次报道了人感染Ss病例,发病25例, 死亡14例[5]。2005年四川省资阳、内江等地发生了大规模的暴发流行疫情, 发病204例, 死亡38例[6]。湖南省自2006年8月报道首例人感染Ss病后,省内又报道过多例散发病例[7,8]。由Ss引起的疫情已成为严重的公共卫生问题。16S rRNA基因普遍存在于原核生物中,含量大,在原核生物中都具有多个拷贝。各种不同类型的细菌具有非常相似的保守序列,不同属的细菌又具有其特异性序列。16S rRNA分子量大小适中,约1 500个核苷酸,便于测序和序列分析。因而它非常适用于对不同细菌进行鉴定分析和系统进化关系的研究,已经被越来越多细菌学家和分类学家接受[9]。2011年底长沙地区先后报告两起疑似人感染Ss病例,分离出2株疑似Ss。本研究尝试通过16S rRNA序列比对分析对其进行鉴定,并与传统鉴定方法进行比较,同时进行系统进化分析,了解长沙2株猪链球菌的进化关系。
2013 Vol. 29 (6): 547-550 [摘要] ( 739 ) [HTML 0KB] [PDF 656KB] ( 1029 )
551 李振军 金东 叶长芸 刘凯 徐建国
屎肠球菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的研究
目的 建立屎肠球菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法。方法 根据屎肠球菌的特异基因设计TaqMan荧光定量PCR的引物及探针,在多种常见致病菌及条件致病菌中检测其特异性;将目的基因克隆到pMD18-T载体中建立标准曲线,检测方法的灵敏度和稳定性;使用腹水模拟标本验证方法的应用性。结果 在特异性评价中,除了阳性对照外其余菌株均未见特异性扩增曲线。建立屎肠球菌TaqMan荧光定量PCR方法的标准曲线,确定本方法对质粒标准品的检测下限为20copy/管。通过对1.0×107、1.0×105和1.0×103三个浓度质粒标准品的重复检测,确定屎肠球菌TaqMan荧光定量PCR方法的组内变异系数为1.90%~3.91%;组间变异系数为1.52%~1.69%。应用屎肠球菌TaqMan荧光定量PCR方法对含菌量为1.6×100~1.6×108cfu/ml浓度梯度的腹水模拟标本进行检测,其检测灵敏度为1.6×102cfu/ml。结论 本研究建立了屎肠球菌TaqMan荧光定量PCR检测方法。
2013 Vol. 29 (6): 551-555 [摘要] ( 709 ) [HTML 0KB] [PDF 717KB] ( 1032 )
556 黄微微 郭刚 宋阳 曾本华 张卫军 谢庆华 杨致邦
人胃源乳杆菌耐受性及抗幽门螺杆菌活性的鉴定
摘要: 目的 分离自人胃粘膜的乳杆菌抗幽门螺杆菌活性的筛选, 为观察乳杆菌与幽门螺杆菌相互作用寻找合适的研究对象。方法 从21例胃镜检查者的胃粘膜组织中分离鉴定出6株乳杆菌,检测其在pH 2.5~pH 4.5和含0.05%~0.2%胆盐条件下的耐受性,并结合琼脂扩散牛津杯法检测其抑制幽门螺杆菌生长的能力及通过细胞试验检测其抗幽门螺杆菌粘附人胃上皮细胞的活性。结果 6株乳杆菌分离株中L3产酸量最大,耐酸和高浓度胆盐,其活菌和上清液在血平板中对幽门螺杆菌作用后形成的抑菌环直径均最大,对大肠杆菌的抑菌环大于金黄色葡萄球菌的,处理液相同的两两比较差异显著(P<0.05),同时能使幽门螺杆菌粘附人胃上皮细胞的粘附率最低。结论 人胃粘膜来源的乳杆菌菌株L3具有较好的耐受性和抗幽门螺杆菌活性,研究结果为幽门螺杆菌感染的微生态治疗提供依据。
2013 Vol. 29 (6): 556-561 [摘要] ( 664 ) [HTML 0KB] [PDF 952KB] ( 1103 )
562 黄黉 林冠峰 陈少琅 刘天才 李明 吴英松
狂犬病毒核蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒研制
目的 研制狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立RV NP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果 试剂盒准确度好,线性范围为5~2 500 mEU/mL,灵敏度为1.018 mEU/mL,精密度良好,分析内精密度为2.7%~9.3%,分析间精密度为3.5%~12.2%。将15份疫苗样品用本法与国内常用ELISA检测试剂盒同时检测,其相关系数r为 0.85,稳定性试验表明试剂可以在4 ℃稳定半年,37 ℃稳定7d。结论 试剂盒各项已检测指标达到临床检验要求,有望替代同类产品进一步作临床检测试验。
2013 Vol. 29 (6): 562-564 [摘要] ( 718 ) [HTML 0KB] [PDF 601KB] ( 1018 )
566 李敏红
浙江省甲型H1N1流感病毒血凝素基因序列分析
摘 要:目的 分析浙江省2009年~2011年甲型H1N1流感病毒血凝素基因(HA)序列进化特征。方法 提取浙江省2009年至2011年8株甲型H1N1流感病毒基因组RNA,RT-PCR扩增血凝素基因,测序并拼接出ORF;从GenBank数据库下载2009年至2012年国内外甲型H1N1流感病毒HA 基因序列,选择20株作为代表进行分析。采用MEGA软件对其进行种系发生树的构建。结果 扩增并测序获得8株甲型H1N1流感病毒1701 bp的HA基因ORF,与国内外甲型H1N1流感病毒HA序列比对后发现所有序列的同源性均较高,2009年和2010年浙江省3株病毒HA与北美早期毒株A/California/04/2009(H1N1)同源性达到99.4%~99.5%,2011年浙江省5株病毒HA与A/California/04/2009(H1N1)同源性为98.5%~99.1%。在1株来自重症患者的毒株中发现了D222G突变。结论 与早期毒株相比,虽然浙江省2011年的甲型H1N1流感病毒血凝素基因累积了更多的变异,但所有毒株的同源性达到98.5%以上。血凝素中D222G突变可能与重症甲型H1N1流感感染相关。
2013 Vol. 29 (6): 566-569 [摘要] ( 703 ) [HTML 0KB] [PDF 611KB] ( 1024 )
570 陈兴智
三种免疫调节剂增强弓形虫重组ROP2疫苗保护效应的研究
摘要: 目的 观察弗氏佐剂(Freund’s Adjuvant,FA)、匹多莫德(Pidotimod,PT)和西咪替丁(Cimetidine,CIM)等三种免疫调节剂增强重组弓形虫棒状体蛋白2(rROP2)疫苗的免疫保护效应。方法 将100只BALB/c小鼠随机分为PBS对照组、重组rROP2疫苗组、FA-rROP2疫苗组、PT-rROP2疫苗组和CIM-rROP2疫苗组等5组;FA、PT和CIM分别与rROP2抗原混合皮下注射免疫,检测小鼠细胞免疫和体液免疫指标,并观察弓形虫RH株攻击感染后的生存时间。结果 FA-rROP组、CIM-rROP2组小鼠血清IFN-γ、特异性IgG、脾细胞增殖活性及外周血CD4+/CD8+比值均显著高于rROP蛋白组(P< 0.05);PT则对外周血CD4+/CD8+比值无明显影响,但显著增加了IFN-γ的水平及脾细胞增殖活性;相较于rROP2组(P< 0.05),PT虽然增加了IgG水平但并不具备统计学意义。小鼠攻击试验表明,PT-rROP2组、CIM-rROP2组、FA-rROP2组小鼠存活时间显著长于rROP2组和PBS对照组组;rROP2蛋白组各项指标均显著高于PBS组(P< 0.05)。结论 FA、PT和CIM可增强rROP2蛋白抗原诱导的细胞免疫和体液免疫反应,其中CIM免疫促进作用接近于FA,PT较弱,都能延长受弓形虫感染小鼠的生存时间,具有增强rROP2蛋白疫苗保护效应的功能。
2013 Vol. 29 (6): 570-574 [摘要] ( 595 ) [HTML 0KB] [PDF 916KB] ( 1009 )
575 谭伟芬 梁伶 刘栋华 韦立莉
黑素在马尔尼菲青霉抵抗巨噬细胞吞噬中的作用
摘要: 目的 比较黑素化培养和非黑素化培养的马尔尼菲青霉酵母相孢子与巨噬细胞相互作用的区别,初步探讨黑素在马尔尼菲青霉致病机制中所发挥的作用。方法 将马尔尼菲青霉酵母相孢子与Ana-1小鼠巨噬细胞系共同培养,分为处理组A、B、C和D组:A组加入干扰素-γ及L-DOPA,B组仅加入干扰素-γ,C组仅加入L-DOPA,D组不加干扰素-γ及L-DOPA,设置空白对照组E为未加任何干预的巨噬细胞。7天后离心收集巨噬细胞和孢子,透射电镜观察比较超微形态变化。结果 无论是否加入干扰素-γ均可观察到巨噬细胞吞噬马尔尼菲青霉酵母相孢子现象。加入L-DOPA培养的A组和C组巨噬细胞内外的酵母相孢子细胞壁内侧均产生了颗粒状电子致密物,一个巨噬细胞吞噬孢子数目在2~6个。未加入L-DOPA培养的B组和D组巨噬细胞内外的酵母相孢子细胞壁内侧无颗粒状电子致密物,一个巨噬细胞吞噬孢子数目在10~25个。结论 L-DOPA可以促进马尔尼菲青霉酵母相孢子黑素颗粒的合成, 黑素化培养的马尔尼菲青霉酵母相孢子逃避巨噬细胞吞噬的能力增强。
2013 Vol. 29 (6): 575-578 [摘要] ( 755 ) [HTML 0KB] [PDF 881KB] ( 1031 )
579 方艳红 王元兰 姚明 魏建忠 孙裴 殷宗俊 王桂军 李郁
明斯特沙门氏菌耐药性产生对其毒力影响的研究
  目的 探讨明斯特沙门氏菌耐药性产生对其毒力的影响。方法 选择一株对药物敏感株作为亲本株,采用亚抑菌浓度体外多步诱导法获得耐药菌株,并比较分析亲本株和DOX、TET+DOX、TET+DOX+CHL、TET+DOX+CHL+KAN耐药菌株半数致死量、质粒毒力基因分布、对小鼠的病理损伤、宿主免疫功能的变化。结果 亚抑菌浓度药物可诱导明斯特沙门氏菌形成相应的耐药菌株,且耐药性相对稳定,但未能获得相应的耐药基因;随着明斯特沙门氏菌耐药性的产生及增强,其LD50、毒力基因以及外周血中T淋巴细胞含量均未发生显著变化,但多重耐药菌株对小鼠的病理损伤和Th1型炎症反应更为严重。结论 明斯特沙门氏菌在长期低剂量的接触抗菌药物后可产生耐药性变异,且随着耐药性的产生及增强,多重耐药菌株的致病性有所增强。
2013 Vol. 29 (6): 579-586 [摘要] ( 763 ) [HTML 0KB] [PDF 2202KB] ( 1132 )
587 韦信贤 童桂香 吴祥庆 谢宗升 黄国秋 廖永志 叶欣宇 黎小正
四重PCR检测致病性嗜水气单胞菌
目的 建立一种能够快速准确地检测致病性嗜水气单胞菌的四重PCR方法。方法 根据致病性嗜水气单胞菌的丝氨酸蛋白酶(ahpA)基因、气溶素(aerA)基因和溶血素(hlyA)基因的保守序列以及嗜水气单胞菌的16S rRNA基因种属特异性序列分别设计四对特异性引物,通过优化各引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,确定了四重PCR的最佳反应条件;然后进行特异性和敏感性试验,并比较其与常规微生物学方法对不同菌株和临床样本的检出率。结果 该方法特异性好,能特异性检测并鉴别出嗜水气单胞菌致病性菌株;检测敏感度高,能检测到约100fg的总DNA;对9株嗜水气单胞菌的检测结果与常规微生物学方法一致,对56份送检的水产动物样品的检出率为21.4%,高于常规微生物学方法的16.1%,两者检测结果符合率为94.6%。结论 成功建立了能同时检测嗜水气单胞菌16S rRNA、aerA、ahpA和hlyA基因的四重PCR方法,能快速、准确地对嗜水气单胞菌进行检测并区分致病性与非致病性菌株。
2013 Vol. 29 (6): 587-593 [摘要] ( 612 ) [HTML 0KB] [PDF 910KB] ( 1172 )
594 黄小波 曹三杰 文心田 李春松 梁恩涛 张鑫淼
减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N融合基因疫苗的口服免疫原性
目的研究携带猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S/N融合基因的重组减毒沙门氏菌的口服免疫原性。方法 将真核质粒pVAX-S/N电转化鼠伤寒减毒沙门氏菌 SL7207,筛选获得疫苗菌株SL7207(pVAX-S/N)。将菌株SL7207(pVAX-S/N)及对照组SL7207(pVAX-S)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的抗TGEV(和抗沙门氏菌均SL7207)的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定42d免疫小鼠的干扰素水平。结果菌株SL7207(pVAX-S/N)构建成功,首免后2~6周可诱导产生抗TGEV(和抗沙门氏菌SL7207)的血清IgG,第4~6周可诱导产生抗TGEV(和抗沙门氏菌均SL7207)的肠道粘膜IgA,SL7207(pVAX-S/N)诱导的IgG和IgA抗体最高滴度均略高于SL7207(pVAX-S),但差异不明显(P>0.05)。SL7207(pVAX-S/N)免疫42d小鼠诱导的干扰素浓度为659.45pg/ml,低于SL7207(pVAXD-S)组。结论S/N融合基因疫苗SL7207 (pVAX-S/N)具有良好的口服免疫原性,但与SL7207 (pVAX-S)无明显差异。
2013 Vol. 29 (6): 594-600 [摘要] ( 826 ) [HTML 0KB] [PDF 763KB] ( 1109 )
601 王净
狂犬病病毒N、G两种蛋白 在间接ELISA方法中的应用比较
目的 为了比较狂犬病N、G两种蛋白检测抗体效果,方法 本研究先通过比较pET-32a(+)和pGEX-6P-1两种载体表达的狂犬病病毒G蛋白和N蛋白,采用碳酸盐纯化表达量高的两种蛋白,再以纯化的抗原用于检测93份免疫犬血清。结果 结果表明:(1)以pGEX-6P-1为载体的N、G两种蛋白表达量较高。(2)碳酸盐包被液可以得到纯度较高的蛋白。(3)间接ELISA检测93份抗体,其中56份G蛋白高于N蛋白,37份N蛋白高于G蛋白。(4)血清样本检测结果都为阳性,表明免疫效果良好。结论 结果提示:针对N、G两种蛋白的抗体在动物体内出现时间不同,哪种抗体出现的早,有待于我们进一步研究。
2013 Vol. 29 (6): 601-604 [摘要] ( 546 ) [HTML 0KB] [PDF 612KB] ( 1079 )
605 陆彦
鸡源印第安纳沙门氏菌对喹诺酮类药物耐药性分析
对山东部分地区养鸡场和屠宰场分离到的130株沙门氏菌进行血清学鉴定,采用微量稀释法检测喹诺酮类药物:萘啶酸、恩诺沙星、诺氟沙星和环丙沙星4种抗沙门氏菌药物的MIC值;采用PCR技术测定菌株携带的喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6’)-Ib-cr,并检测部分菌株喹诺酮类耐药决定区基因突变。结果显示,采集的菌株血清型为印第安纳沙门氏菌(养殖场52株、屠宰场78株)。养殖场和屠宰场的沙门氏菌对萘啶酸、恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星的耐药率分别为100%、73.1%、71.2%、82.7%和100%、59.0%、79.5%、80.2%。PCR测定qnrA、qnrB、qnrS、qepA耐药基因结果为阴性,aac(6’)-Ib-cr耐药基因的检出率很高,在养鸡场和屠宰场分别为90.3%和92.5%。被检菌株中全部出现gyrA突变、部分菌株发现parC突变,没检测到gyrB、marA基因突变。
2013 Vol. 29 (6): 605-608 [摘要] ( 616 ) [HTML 0KB] [PDF 538KB] ( 981 )
609 池细俤
72株多重耐药鲍曼不动杆菌随机多态性DNA分析的基因分型与院内感染
摘要:目的 了解导致院内感染的多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug resistance Acinetobacter baumannii MDRAB)的同源性及院内流行特征,为临床控制MDRAB感染、制定合适的防控措施提供依据。方法 运用随机扩增多态性DNA (random amplified polymorphic DNA RAPD)技术对院内感染MDRAB菌株进行基因分型,用聚类分析软件进行同源性分析。结果 72株MDRAB分为7个基因型;A型:22.2%;B型:4.2%;C型:40.3%;D型:2.8%;E型:2.8%;F型:1.4%;G型:26.4%;A、C、G型MDRAB在ICU及神经外科发生3次感染暴发。结论 MDRAB在ICU及外科病房易发生交叉感染;RAPD是院感暴发及流行病学的较好的研究手段。
2013 Vol. 29 (6): 609-613 [摘要] ( 721 ) [HTML 0KB] [PDF 743KB] ( 1087 )
综述
614 郑学礼
蚊虫细胞表达登革病毒受体蛋白的研究进展
:登革病毒(DENV)是登革热病原体,它经一个感染蚊于摄取血餐期间将病毒传播至人类。登革感染是世界范围内的一个严重公共卫生问题。一个病毒连接至一个宿主细胞是感染过程关键性第一阶段,其过程所涉及细胞蛋白鉴定与机制大部分仍然未知。本文就蚊细胞表达登革病毒的连接分子研究概况进行综述。
2013 Vol. 29 (6): 614-619 [摘要] ( 823 ) [HTML 0KB] [PDF 783KB] ( 1146 )
620 杜海娟 田春林
弓形虫多价疫苗研究近况
弓形虫疫苗研制已经历了全虫疫苗、抗原组份疫苗、基因工程亚单位疫苗和核酸疫苗发展阶段,结果表明基因工程多价疫苗具有较大的前景。本文综述了弓形虫多价疫苗的研制、应用和目前存在的问题及解决策略。
2013 Vol. 29 (6): 620-624 [摘要] ( 827 ) [HTML 0KB] [PDF 690KB] ( 1164 )
625 马天武 井申荣 黄芬
RNA干扰抗戊型肝炎病毒感染的研究进展
戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)是一种可跨种间传播,严重危害人类健康的病毒性肝炎(hepatitis E, HE)的病原体,目前尚无有效的治疗方法和药物。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是真核生物的一种自我保护机制,可以阻止病毒入侵宿主细胞。RNAi技术广泛应用于病毒基因的转录后调节,已经成功抑制了多种病毒的复制。现介绍RNAi的干涉机制在抗戊型肝炎病毒中的研究进展。
2013 Vol. 29 (6): 625-627 [摘要] ( 689 ) [HTML 0KB] [PDF 421KB] ( 1058 )
628 李轲 周水森 黄芳
基因多态性在恶性疟原虫种群分型及溯源中的应用
恶性疟原虫不同地理株间存在表型差异,其基因多态性对疫苗研制、新药研发以及基因溯源、多重或(多克隆)感染诊断、输入性疟疾诊治等方面具有重要意义。本文对恶性疟原虫基因多态性在种群分型和溯源研究方面的应用进行综述。
2013 Vol. 29 (6): 628-632 [摘要] ( 671 ) [HTML 0KB] [PDF 676KB] ( 1057 )
调查防治
633 米景川 韩 勇 林鸿鸣 李晓燕
内蒙古阿荣旗重点职业人群布鲁氏菌疫苗干预后5年效果分析
内蒙古阿荣旗重点职业人群布鲁氏菌疫苗 干预后5年效果分析 米景川1 ,韩 勇2 ,林鸿鸣3 ,李晓燕1, 塔 娜1 1.内蒙古自治区地方病防治研究中心 2.呼伦贝尔市疾病预防控制中心 3.内蒙古阿荣旗疾病预防控制中心 摘要:目的 探讨对重点职业人群实施布鲁氏菌疫苗干预后的免疫保护作用。方法 在2005年阿荣旗接种人用布鲁氏菌疫苗的2200例高危职业人群中,2010年10月回访调查1772人,根据RBPT及SAT (WS269―2007)方法结合既往病史和临床症状确诊布病病人22例(其中最长潜伏期内发病9例),以此结果分析接种布鲁氏菌疫苗后5年的保护效果。结果 (1)实施布鲁氏菌疫苗干预后,阿荣旗布病报告病例呈明显的下降, 2006年较2005年下降了84.17%,发病率由347.32/10万下降至54.45/10万,显示疫苗干预有明显效果。(2)疫苗干预5年后回访调查重点职业人群布病的总发病率仅为0.73%,远低于呼伦贝尔市重点人群的平均发病率水平。结论 布鲁氏菌疫苗接种对人群具有明显的免疫保护作用。 关键词:布鲁氏菌病;布鲁氏菌疫苗;干预;免疫保护作用。
2013 Vol. 29 (6): 633-635 [摘要] ( 783 ) [HTML 0KB] [PDF 494KB] ( 1009 )
636 郑磊
病毒感染性腹泻患者肛拭样品中诺如病毒分析研究
目的 了解本地区病毒感染性腹泻患者诺如病毒感染情况,进一步探索诺如病毒流行规律和流行因素,为制订防控对策提供依据。方法 从2008年3月至2010年2月由嘉定区中心医院采集病毒感染性腹泻患者肛拭样品共572份,采用实时荧光逆转录聚合酶链反应法(Real-Time RT-PCR)检测病毒核酸。结果 572份病毒感染性腹泻患者肛拭样品中RT-PCR检测核酸阳性53例,阳性率为9.27%。结论 嘉定区病毒性感染腹泻中有近10%的患者由诺如病毒感染引起,冬季可能为流行高峰,65岁以上为重点人群。
2013 Vol. 29 (6): 636-638 [摘要] ( 680 ) [HTML 0KB] [PDF 433KB] ( 957 )
中国人兽共患病学报
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