中国人兽共患病学报
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中国人兽共患病学报
 
2018年 34卷 10期
刊出日期:2018-10-20

论著
实验研究
综述
疾病防治
学术资料
   
论著
865 赵凯英, 刘孝琪, 敬吉波, 曹育嘉, 张聂珂, 张仪迪, 高大庆, 陆承平
迟缓爱德华菌T3SS转位因子EseC促炎反应
目的 Ⅲ型分泌系统(T3SS)是迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,简称Et)一种重要的毒力因子, EseC是T3SS一个转位因子。通过缺失eseC基因,探索Et菌T3SS与该菌感染细胞和组织后,诱导宿主产生炎症反应的关系。方法 构建Et.CD菌eseC基因缺失株及其互补株;用菌落计数法比较两菌株在RAW264.7巨噬细胞胞内存活数目;用CCK-8法比较两菌株感染巨噬细胞后的细胞存活率;利用流式比较野生株和缺失株诱发巨噬细胞的细胞坏死。分别将野生株和缺失株注射小鼠腹腔,用菌落计数法比较两菌株在肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中细菌CFU/mL,以及通过观察这些器官的大小和HE染色切片组织,比较两菌株对这些小鼠组织的炎症反应;用ELISA比较这些小鼠血清促炎性细胞因子IL-1β 和 TNF-α的浓度;用RT-PCR,比较野生株和缺失株效应蛋白基因转录水平。结果 eseC基因缺失后,Et感染巨噬细胞后,胞内细菌数目和细胞存活率均明显降低, 说明野生株感染细胞后,可通过其T3SS引起更多细胞的死亡,释放出更多细菌成份;野生株可通过其T3SS诱导更多巨噬细胞发生坏死,伴有大量促炎症因子的释放;T3SS有助于野生株在肝、肺、脾和肾中组织中的大量增殖;野生株感染小鼠后,和eseC基因缺失株相比,它们的肝脏,脾脏和肺脏外观明显肿大,肝、肺、脾和肾组织中有明显的急性炎症反应,野生株诱发产生的促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β浓度明显高于缺失株;RT-PCR结果显示,eseC基因的缺失使得Et菌的T3SS效应蛋白的eseJeseE基因转录水平明显下降。结论 eseC基因可以通过T3SS影响Et在组织和细胞的致炎作用。
2018 Vol. 34 (10): 865-872 [摘要] ( 67 ) [HTML 1KB] [PDF 3457KB] ( 535 )
873 朱慕春, 刘劲峰, 陆忠奎, 孔德龙
华支睾吸虫排泄分泌抗原McAb的制备及双抗夹心ELISA的初步建立
目的 以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法 用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效价单克隆抗体并鉴定;单抗经HRP标记和配对筛选,建立双抗夹心ELISA并分析其特异性及灵敏度。结果 成功制备出抗华支睾吸虫ESA McAb:B7、F1;抗体类型均为IgG1,抗体滴度高,特异性好,以筛选到的两株单抗建立双抗夹心ELISA法,最佳线性范围为0.014~0.248 μg/mL(R2=0.996 9),最低检出限为0.014 μg/mL。结论 初步建立了检测华支睾吸虫ESA的免疫诊断方法。
2018 Vol. 34 (10): 873-877 [摘要] ( 44 ) [HTML 1KB] [PDF 1583KB] ( 529 )
实验研究
878 钱凌霄, 康立超, 李红欢, 张奇文, 杜冬冬, 马勋
食源性单增李斯特菌14种潜在毒力基因的检测
目的 了解新疆生产建设兵团食源性单核细胞增生性增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)潜在毒力基因分布情况。方法 以54株食源性LM DNA为模板,针对14个潜在毒力基因设计特异性引物并利用PCR技术检测潜在毒力基因。结果 54株分离株均携带潜在毒力基因,其中5563分离株携带率最高,为57.14%(8/14),21L662分离株携带率最低,为21.43%(3/14),其余分离株携带率在28.57%(4/14) ~50%(7/14)之间。潜在毒力基因检出率不同,其中寡肽转运蛋白、内化素样蛋白、细胞壁表面锚定家族蛋白、单价阳离子/H+逆向转运蛋白、肽聚糖结合蛋白、组氨酸代谢系统、合成致死KAR3样蛋白、精氨酸/鸟氨酸逆向转运蛋白、ABC转运蛋白、型限制酶修饰系统Sau3 Al,磷酸葡萄糖转移酶系统基因的检出率分别是98.15%、81.48%、77.78%、64.81%、59.26%、53.70%、51.85%、35.19%、12.96%、9.26%、9.26%,芳香族氨基酸合成因子,EsaC蛋白类似物,差向异构酶/脱水酶家族蛋白和转录调控因子3种潜在毒力基因未检出。结论 检测食品源LM分离株14种潜在毒力基因的分布,为研究LM致病性和食品LM的溯源奠定了基础。
2018 Vol. 34 (10): 878-882 [摘要] ( 43 ) [HTML 1KB] [PDF 1430KB] ( 596 )
883 祝子伏, 董辉, 苏瑞景, 陆瑶瑶, 王梦瑶, 杨玉荣
Chinese 1型弓形虫在终宿主家猫肠内发育的研究
目的 观察研究TgCatCHn4(Chinese 1)株弓形虫在猫回肠上皮细胞发育过程中的虫体形态特点,对小鼠RH株弓形虫急性感染期的病理变化和虫体分布进行探讨。方法 复制弓形虫感染的终末宿主和中间宿主模型,采用石蜡切片H&E染色和IHC染色方法。结果 家猫摄入弓形虫包囊后,可成功排泄弓形虫卵囊(3DPI~10DPI)。回肠病理变化主要表现为吸收细胞脱落和固有层淋巴细胞的坏死,可观察到弓形虫在回肠上皮裂殖生殖和配子生殖各阶段虫体的形态。RH株弓形虫感染的小鼠病理损伤主要表现为肝脏、脾脏和淋巴结的局灶性坏死,坏死灶分布多量速殖子,虫体多以花瓣状、簇状分布。结论 详细探讨了弓形虫感染猫和小鼠后的虫体形态学和对机体的病理损伤特点,为弓形虫在终末宿主和中间宿主的病理诊断和入侵机制研究提供参考依据。
2018 Vol. 34 (10): 883-887 [摘要] ( 54 ) [HTML 1KB] [PDF 3264KB] ( 613 )
888 张益源, 罗嘉婧, 伊正君, 付玉荣
结核分枝杆菌调节miRNAs及circRNAs抗细胞自噬机制的生物分析
目的 探索结核分枝杆菌抵抗人或小鼠巨噬细胞自噬机制的关键miRNAs及circRNAs,为寻找新型结核诊断标志物及治疗靶点提供思路。方法 筛选出结核分枝杆菌诱导细胞差异表达的自噬相关基因;制作蛋白交互图并文献挖掘筛选关键自噬基因;多数据库综合预测相应的miRNA,制作自噬基因mRNA-miRNAs交联图并筛选关键miRNA;制作miRNAs-circRNAs相互作用图并筛选关键circRNA。结果 筛选出18种结核感染后差异表达的自噬相关基因,并在此基础上预测16种自噬关键基因;筛选出4种通过靶向自噬mRNA参与自噬调控的关键miRNA分子(miR-17-5p, miR-20a-5p, miR-30a-5p, miR-33-5p);针对4种miRNA筛选出6种与其密切相关的circRNA分子,并预测hsa-circRNA2908和hsa-circRNA6439是影响结核抗自噬关键circRNA分子。结论 miR-miR-17-5p, miR-20a-5p, miR-30a-5p, miR-33-5p及其上游共同调控分子hsa-circRNA2908和hsa-circRNA6439可能是潜在的诊断标志物和疾病治疗靶点。
2018 Vol. 34 (10): 888-894 [摘要] ( 60 ) [HTML 1KB] [PDF 3600KB] ( 480 )
895 郑月燕, 黄文龙, 欧剑鸣, 陈光敏
福建省2008—2017年乙型病毒性肝炎流行病学分析和时空聚集探测
目的 了解福建省历年乙型病毒性肝炎(乙肝)报告发病情况,为乙肝防控提供参考依据。方法 将福建省疾病监测信息管理系统中2008—2017年乙肝报告情况表结合国家统计局人口资料建立数据库,描述乙肝报告的基本特征,分析乙肝报告发病的地区分布。结果 福建省2008—2017年乙肝报告发病率呈现逐年下降趋势(Z=50.53,P<0.01)。历年年均报告发病率男性(172.94/10万)高于女性(79.95/10万);25~30岁年龄组年均报告发病率最高为214.12/10万;历年累计报告病例中农民占比最高(37.89%)。历年累计报告发病率呈现东北部(福州地区)高于全省其他地区,东中南部近海地区(厦门、泉州南部地区)低于全省其他地区。随着时间的推移,报告发病率高发的地区从东中部逐渐向北、略向西扩散。结论 福建省乙肝病例报告发病率逐年下降,但仍高于全国平均水平;东中部近海地区报告发病率高,东南部近海地区报告发病率低。
2018 Vol. 34 (10): 895-901 [摘要] ( 50 ) [HTML 1KB] [PDF 3912KB] ( 633 )
902 刘学雷, 王云杰, 杨宁爱, 安童童, 康宇婷, 贾伟, 苏雅静, 赵志军
弓形虫感染对THP-1巨噬细胞极化影响的研究
目的 探讨弓形虫感染对体外诱导的人外周血单核细胞(Human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)极化特点的影响。方法 用佛波酯(PMA)诱导THP-148 h使之由悬浮的单核细胞诱导为贴壁的巨噬细胞,体外选择不同时间点感染弓形虫,用Diff染色分析弓形虫在细胞内的增殖情况。Western blot检测极化相关蛋白,Q-PCR检测mRNA的表达情况。结果 成功诱导得到贴壁的巨噬细胞模型,感染弓形虫后,M1型巨噬细胞标志性蛋白iNOS 及M2型巨噬细胞标志型蛋白Arg-1 36 h表达量与对照组差异明显(t=10.23,P<0.05)。Q-PCR的结果显示不同的处理组IL-1、IL-12、iNOS和TNF-α逐渐减少,而IL-10、Arg-1呈逐渐增加,到36 h达到顶峰(t=9.587,P<0.05)。结论 弓形虫RH株感染THP-1巨噬细胞后可以在胞内生长增殖,THP-1细胞感染后向M2型巨噬细胞方向极化。
2018 Vol. 34 (10): 902-907 [摘要] ( 53 ) [HTML 1KB] [PDF 2129KB] ( 575 )
908 徐银燕, 陈帅, 张杰文, 史晓红, 吴奇, 胡春雨, 陈淅泠
散发型克-雅病中血清尿酸水平探讨
目的 探讨血清尿酸水平在散发型克-雅病(sCJD)中的意义。方法 选取2012年1月—2018年1月在郑州大学人民医院及第二附属医院神经内科符合临床诊断的散发型克-雅病患者23例(sCJD组),并选择同期健康体检者23例(对照组)。收集所有参与者年龄、性别、临床及辅助检查资料、血清尿酸、确诊时的病程、生存期等资料,进行比较分析。结果 sCJD组血清尿酸水平明显低于对照组(215.83±71.92)μmol/L VS(264.35±73.67)μmol/L,t=2.260,P=0.029)。低尿酸组sCJD患者与高尿酸组sCJD比较,其发病年龄更低(55.83 VS 63.27;U=99.500,Z=2.066,P=0.039),而生存期无差异。结论 低血清尿酸可能为散发型克-雅病的易感因素,且与发病年龄有关。高水平的血清尿酸,很可能是散发型克-雅病的保护因素。
2018 Vol. 34 (10): 908-911 [摘要] ( 43 ) [HTML 1KB] [PDF 1099KB] ( 545 )
912 王建忠, 钟建平, 金法祥, 王华钧, 许文芳, 费迎明, 陈雪芳
耐药嗜水气单胞菌毒力与六类抗菌药物耐药元件基因研究
目的 了解嗜水气单胞菌毒力基因与耐药基因的分布情况,为嗜水气单胞菌感染的治疗提供参考依据。方法 分离自2014年1月至2017年10月本院内科住院病人的10株嗜水气单胞菌;采用PCR法,对10株嗜水气单胞菌检测3种毒力基因与54种耐药基因,并对检测结果作样本聚类分析。结果 10株耐药嗜水气单胞菌3种重要的毒力基因检测结果,hlyA基因检出率为100.00%,aerA基因检出率为20.00%, rtxA基因无检出。10株耐药嗜水气单胞菌6种β-内酰胺酶基因, blaAQU与blaMOX基因表达AmpC型β-内酰胺酶,10株中有5株同时检出blaAQU与blaMOX基因,1株仅检出blaMOX基因, 6株AmpC酶三维试验均呈阳性。对10株耐药嗜水气单胞菌和1株敏感嗜水气单胞菌3种毒力基因与6类抗菌药物54种耐药元件基因检测结果作UPGMA法样本聚类分析, 10株耐药嗜水气单胞菌和1株敏感嗜水气单胞菌可分为A与B二个群。结论 10株耐药嗜水气单胞菌共检出β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、氯霉素类等5类抗菌药物17种获得性耐药基因。7种可移动遗传元件标记基因,有5株检出1~3种可移动遗传元件标记基因。10株耐药嗜水气单胞菌3种毒力基因与54种耐药元件基因同步检测显示,每株至少检出1种毒力基因和2种耐药基因,嗜水气单胞菌对抗菌药物的耐药率上升必须严密监测。
2018 Vol. 34 (10): 912-919 [摘要] ( 46 ) [HTML 1KB] [PDF 5072KB] ( 562 )
920 高博, 郑晖, 李枢, 谢联辉
登革热病毒(DENV)包膜蛋白特异性人源抗体筛选与鉴定
目的 建立自外周血快速筛选识别登革热病毒衣壳的人源抗体的方法,从病毒感染者外周血记忆B细胞中筛选出特异性抗体并进行性质分析。方法 通过流式细胞术分选得到外周血中登革热病毒包膜蛋白特异性的单个记忆B细胞,结合高效单细胞PCR技术获得抗体基因序列,对重组表达的单克隆抗体进行结合活性及中和活性检测。结果 成功筛选到识别DENV-1包膜蛋白的6株人源单克隆抗体,其中4株抗体均具有很强的结合活性以及中和活性。结论 成功的通过流式细胞术对DENV特异性记忆B细胞进行分选,并结合单细胞PCR技术,实现了对DENV特异性人源单克隆抗体的高效筛选。通过该平台有希望筛选得到DENV的广谱中和抗体,用于登革热的预防和治疗。
2018 Vol. 34 (10): 920-926 [摘要] ( 40 ) [HTML 1KB] [PDF 3559KB] ( 587 )
综述
927 许燕苹, 徐正中, 陈祥, 焦新安
噬菌体在食源性病原菌防控中的应用
近年来,病原微生物引起的食源性疾病在世界范围内频发,对人类健康及公共卫生安全造成严重威胁。而在抗菌药物使用日趋严格和规范的状况下,耐药性传播等问题依然存在,迫切需要新的防控手段。噬菌体因其可吸附并裂解细菌从而达到杀菌效果,这为食源性病原菌的生物防控开辟了新的道路,本文就噬菌体及其裂解酶在食品安全防控方面的应用作一综述,旨在为食源性病原菌防控提供参考。
2018 Vol. 34 (10): 927-930 [摘要] ( 48 ) [HTML 1KB] [PDF 1033KB] ( 509 )
931 郑斌, 李金娜
弓形虫感染与阿尔茨海默病相关性的研究进展
阿尔茨海默病(Alzheimer?s disease, AD)是老年人常见的一种中枢神经系统退行性疾病,AD的发病机制尚未完全阐明。多项研究发现:AD患者血清弓形虫抗体阳性率高于对照组;弓形虫感染可诱发或加重认知障碍、记忆进行性减退等AD样症状;弓形虫感染引起脑组织Aβ沉积、Tau蛋白高度磷酸化和神经元损伤等AD样病变。研究结果提示弓形虫感染与AD具有关联性。本文就弓形虫感染与AD相关性的研究进展做一综述。
2018 Vol. 34 (10): 931-935 [摘要] ( 53 ) [HTML 1KB] [PDF 1088KB] ( 584 )
936 朱事康, 周宇, 刘星, 佟铁铸, 李春萍
乌苏图病毒及其人畜动物感染的研究进展
乌苏图病毒为上世纪在非洲蚊虫标本中分离的病毒,此后证明为黄病毒科黄病毒属病毒。近十余年,该病毒不仅在非洲许多国家的蚊虫中多次分离到该病毒,特别是在远离非洲上万公里的欧洲许多国家的蚊虫中分离到乌苏图病毒,并且不断发现由乌苏图病毒感染引起的大批鸟的死亡,甚至发生人类感染的病例。乌苏图病毒已经成为一种新发的,长距离传播的虫媒病毒,引起国际关注。我国尚未在蚊虫中发现乌苏图病毒,也未见该病毒感染人畜动物的报道。本文总结目前国际上有关乌苏图病毒的研究进展,以推动我国对该病的相关研究。
2018 Vol. 34 (10): 936-943 [摘要] ( 44 ) [HTML 1KB] [PDF 1150KB] ( 499 )
944 冯振月, 刘德福, 崔玉东
大肠杆菌ABC转运体研究进展
ABC转运体是整合膜蛋白,穿过细胞膜转运物质,其广泛分布于细菌、真菌和真核生物体内。最近发表的ATP酶结构域、底物结合蛋白及全长转运体的晶体结构[1]对我们认识转运体的分子结构提供了新的依据。生物信息学方法可确定大肠杆菌的所有转运体以及它们与其它已知转运体的关系,本文就从已经获得的结构数据及构象推测主要集中对大肠杆菌ABC转运体研究进展做一综述。
2018 Vol. 34 (10): 944-949 [摘要] ( 67 ) [HTML 1KB] [PDF 1082KB] ( 731 )
疾病防治
950 杨旭欣, 于守鸿, 马丽, 谢辉, 张爱萍, 赵元博, 李积权, 徐立青
胶体金免疫层析技术在羊布鲁氏菌病的检测应用
目的 了解胶体金免疫层析技术(GICA)检测布鲁氏菌病血清的效果。方法 选择格尔木送检的299份羊血清,分别采用GICA、虎红试管凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)3种方法进行布病检测,分析3种方法检测结果的一致性。结果 3种方法的检测结果进行两两对比后,RBPT与 SAT的一致性检验结果kappa值为0.972(χ2=282.563,P<0.001);GICA与SAT的一致性检验结果kappa值为0.940(χ2=256.577,P<0.001)。结论 说明GICA的实验结果与SAT的实验结果具有高度一致性。
2018 Vol. 34 (10): 950-951 [摘要] ( 42 ) [HTML 1KB] [PDF 981KB] ( 633 )
952 史伟, 张蕾, 李慎, 许晶, 马萍, 徐艺, 董建华, 董丽芳, 余鹏博
2011-2017年陕西省外环境中禽流感病毒污染情况分析
目的 了解陕西省外环境禽流感病毒污染状况,为陕西省人感染禽流感疫情防控、预测和预警提供依据。方法 在陕西省选取城乡活禽市场、家禽规模养殖场(户)、家禽屠宰加工厂等不同类型监测场所,采用PCR法对外环境标本进行禽流感病毒核酸检测,多组间率的比较采用χ2检验。结果 2011年1月至2017年12月,共采集外环境标本6 426份,检出A型禽流感病毒阳性率为7.61%。其中H9亚型阳性占74.23%,H5亚型阳性占15.34%,H7亚型阳性占3.89%,A型未分型及混合型阳性占5.73%。发现活禽市场禽流感病毒污染为主;宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭标本和清洗禽类污水的禽流感病毒阳性率最高。结论 陕西省禽类相关环境中存在禽流感病毒,以H9亚型为主,城乡活禽市场和家禽屠宰加工厂受病毒污染较重。
2018 Vol. 34 (10): 952-956 [摘要] ( 38 ) [HTML 1KB] [PDF 1039KB] ( 569 )
957 蒋峰, 张浩
芜湖水域麦穗鱼感染华支睾吸虫囊蚴的调查
目的 旨在了解芜湖地区部分水域野生麦穗鱼感染华支睾吸虫囊蚴情况,为华支睾吸虫病的防治工作提供参考。方法 从芜湖地区部分水域(牛屯河、扁担河、漳河、奎湖和龙窝湖)捕捞麦穗鱼,采用鱼肉直接压片镜检法和胃蛋白酶消化法从麦穗鱼肌肉中分离囊蚴,并利用获得的囊蚴感染家猫,证实麦穗鱼所感染华支睾吸虫囊蚴。结果 芜湖5个水域中的麦穗鱼均有华支睾吸虫囊蚴感染,其平均感染率为34% (34/100),平均感染度为120.1个/条,且阳性麦穗鱼背部肌肉(前背肌肉、中背肌肉、后背肌肉)均有华支睾吸虫囊蚴的感染,腹部肌肉和尾部肌肉的感染率较低。结论 芜湖地区部分水域野生麦穗鱼感染华支睾吸虫囊蚴的情况较为普遍,应加强宣传和防治工作,以防止华支睾吸虫病的流行。
2018 Vol. 34 (10): 957-960 [摘要] ( 46 ) [HTML 1KB] [PDF 1263KB] ( 605 )
961 王曼, 陈秀云, 罗乐, 毛云霞, 陈雪琴, 李雷
2014-2018年中山市人感染H7N9禽流感病例特征分析
目的 了解2014年1月至2018年5月中山市人感染H7N9禽流感病例临床特征并分析其流行病学特征。方法 收集整理2014年1月至2018年5月中山市H7N9病例个案调查资料。结果 中山市累计报告15例H7N9病例,其中3岁以下女童3人,临床表现为上呼吸道感染,预后良好。12例成人病例,年龄34-78岁(中位数54岁),男性占58.3%(7/12)。成人病例发病后4-8 d(中位数5 d)均出现呼吸困难、严重低氧血症等重症肺炎表现,需要呼吸机辅助通气治疗措施。4例(26.7%)死亡,其中3例为50岁以上且有高血压等基础疾病。60.0%(9/15)发病时间集中于1月下旬至2月上旬。10例可能传播途径为禽类接触传播,其中6例从市场购买活禽回家并亲自宰杀。2例有活禽市场暴露但无活禽直接接触史,可能传播途径为禽类市场空气传播。共发现3起聚集性疫情,其中2起发生人传人的可能性大。结论 在H7N9流行季节,尤其是1月下旬至2月上旬疫情高发期,中山市应采取综合措施,降低居民,尤其是50岁以上有基础疾病者,从市场购买活禽回家及宰杀活禽等高风险行为。
2018 Vol. 34 (10): 961-965 [摘要] ( 43 ) [HTML 1KB] [PDF 1074KB] ( 533 )
学术资料
966 陈宏彬译,翁育伟,黄丰校
美国《Emerging Infectious Diseases》2018年第8期有关人兽共患病论文摘译
2018 Vol. 34 (10): 966-967 [摘要] ( 42 ) [HTML 1KB] [PDF 314KB] ( 418 )
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