引用本文
杨劲松, 原灵, 陈爱平, 李曲文, 林震宇, 谢芳钦, 王灵岚, 严延生. 福建省首次发现米克戴德军团菌感染病例[J]. 中国人兽共患病学报, 2015,31(4): 345-347
YANG Jin-song, YUAN Ling, CHEN Ai-ping, LI Qu-wen, LIN Zhen-yu, XIE Fang-qin, WANG Ling-lan, YAN Yan-sheng. Identification of the first case of Legionella micdadei infection in Fujian Province [J]. CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES, 2015,31(4): 345-347  
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中国人兽共患病学报
福建省首次发现米克戴德军团菌感染病例
杨劲松1,2, 原灵1, 陈爱平1,2, 李曲文1, 林震宇1, 谢芳钦1, 王灵岚1, 严延生1,2
1.福建省疾病预防控制中心,福州 350001
2.福建省人兽共患病研究重点实验室,福州 350001
原灵,Email:fjcdcxjyuanling@yahoo.com.cn
基金:福建省自然科学基金资助项目(2009J01106)
摘要

目的 对1例重症肺炎患者进行军团菌病确诊和血清分型,为该血清型军团菌病的诊疗提供科学依据。方法 对病例开展流行病学个案调查和临床病案分析;采集病例标本进行血清抗体检测和常规分离鉴定,对菌株进行生化试验和血清分型;运用PCR技术进行分子诊断。结果 患者2份血清军团菌抗体均为阳性,军团菌培养阳性,生化特性与军团菌相符;菌株与非嗜肺军团菌乳胶凝集阳性,与米克戴德军团菌诊断血清产生凝集。结论 该患者被确诊为感染米克戴德军团菌,为我省首次发现该血清型感染病例;对免疫功能低下且原因不明的肺炎病例应尽早开展军团菌的相关检测,为合理使用抗生素提供依据。

关键词: 军团菌病; 米克戴德军团菌; 血清型; PCR
中图分类号:R372 文献标志码:A 文章编号:1002-2694(2015)04-0345-03
Identification of the first case of Legionella micdadei infection in Fujian Province
YANG Jin-song1,2, YUAN Ling1, CHEN Ai-ping1,2, LI Qu-wen1, LIN Zhen-yu1, XIE Fang-qin1, WANG Ling-lan1, YAN Yan-sheng1,2
1.Fujian Center for Disease Control and Prevention, Fuzhou 350001, China
2.Key Laboratory of Fujian Province for Zoonotic Disease Research, Fuzhou 350001, China
Corresponding author: Yuan Ling, Email: fjcdcxjyuanling@yahoo.com.cn
Fund:Supported by the Natural Science Foundation of Fujian Province (No.2009J01106)
Abstract

We made a definite diagnosis and serotyping on a Legionella disease, in order to provide scientific basis for the diagnosis and treatment of such serotype. An epidemiological investigation and medical records analysis were carried out, and then the samples of the case were collected for the detection of serum antibody, isolation and identification. The isolated strain was carried on biochemical test, serotype and molecular diagnosis by Polymerase chain reaction. Two samples of serum antibody and the culture of Legionella were positive; the characteristics of biochemical test corresponded with Legionella; the isolate coagulated with the non-pneumophila Legionella latex agglutination and diagnostic serum of Legionella micdadei. The patient was definitely diagnosed to be Legionella micdadei disease, which was found in Fujian Province for the first time. The cases of pneumonia with unknown origin and low immunity should be carried on related detection of Legionella as soon as possible, so as to provide evidence for the use of antibiotics.

Keyword: Legionella disease; Mick DadeLegionella; serotype; PCR

军团菌病是由军团菌引起的呼吸道传染病, 人感染后主要表现为两种临床类型:一种是以发热、咳嗽和肺部炎症为主的肺炎型; 另一种是类似流感症状、病情较轻的非肺炎型, 又称庞蒂亚克热(Pontiac fever)。由于该病无特征性症状、体征及胸部X线表现, 在临床上往往容易被忽视。2014年9月, 我们从医院送检的1份重症肺炎病例的肺泡灌洗液标本中分离到1株米克戴德军团菌, 这是我省首次发现该血清型的非嗜肺军团菌, 也是我省首次发现米克戴德军团菌感染病例。现将结果报告如下。

1 病例资料
1.1 临床摘要

患者, 男, 47岁。2014年4月曾因IgA肾病收治入福建医科大学附属第一医院ICU科, 给予美卓乐、甲强龙(糖皮质激素)及骁悉(免疫抑制剂)治疗, 后转入肾内科; 8月出现发热, 体温最高达40 ℃, 伴咳少许黄白痰, 8月25日以“ 反复颜面浮肿、泡沫尿6月余, 咳嗽、发热1月” 为主诉再次入院。入院查体:T 37.4 ℃, P 96 次/min, R 19 次/min, BP 126/86 mmHg。神清, 全身浅表淋巴结肿大未触及, 双眼睑轻度浮肿, 双肺呼吸音粗, 未闻及干湿性啰音, 双下肢轻度凹陷性浮肿。入院后给予比阿培南、利奈唑胺、头孢哌酮舒巴坦、氟康唑等多种抗生素抗感染辅以改善循环、降脂等处理后、仍有发热且病情加重, 9月2日患者因重症肺炎、呼吸衰竭由肾内科转入ICU治疗, 该患者在医院进行血液细菌培养, 均为阴性。因病因未明于9月15日请求福建省疾控中心流行病学医师会诊后建议进行军团菌相关检测, 9月19日被确诊为军团菌感染病例, 改用拜复乐等喹诺酮类药物治疗, 9月30日胸片显示渗出性病变吸收, 未见实变。

1.2 流行病学资料

1.2.1 基本资料 患者男性, 47岁, 居住地为南平市延平区, 职业为农民, 既往患有肾病综合征、高血压等基础性疾病。

1.2.2 流行病学史 患者2014年4月曾因IgA肾病收治入福建医科大学附属第一医院ICU科, 给予激素和免疫抑制剂治疗; 8月6日出现发热咳痰, 并于25日再次入院, 体温最高达40℃。发病前2周内去过的公共场合只有附属第一医院, 未接触过不明原因发热或肺炎患者。

1.2.3 血清标本采集 住院期间, 先后共采患者血清2次(9月18日第1次、10月9日第2次)进行军团菌抗体检测。

1.3 实验室检查

8月22日血常规:WBC 9.18× 109/L, Hb 108 g/L, N 77.1%; 8月27日, 血常规:WBC 13.54× 109/L, Hb 121g/L, N 89.1%; 尿常规:隐血2.0(2+)mg/L, 红细胞7.20 个/HP, 蛋白质1.0(2+)g/L; 肺部CT(8月25日):双肺磨玻璃密度增高影; 胸片(9月16日)双肺仍可多见斑片状密度增高影, 边缘模糊, 较前有所吸收, 肋膈角稍模糊, 较前改善, 渗出性病变有所吸收。9月30日胸片显示双肺渗出病变基本吸收。

2 材料与方法

GVPC平板、BCYE-α 平板、BCYE-cys和血平板均购于广东环凯生物科技有限公司; 生化反应管购自青岛海博生物有限公司, 军团菌诊断血清购自天津生物芯片有限公司, 乳胶试剂购自英国OXOID公司; 军团菌血清抗体检测试剂盒为德国赛润公司的产品, 参照文献[1]进行检测; 病例标本菌株培养参照文献[2]进行检测; PCR试验仪器和试剂包括:英国G-Storm PCR仪, 美国Bio-Rad XR+ 自动凝胶成像分析仪, PCR反应试剂盒、DL 2000Marker 购自Takara公司; 引物参考文献[3], 由上海生工合成。

3 结 果
3.1 血清学检测

本实验室于2014年9月18日和10月9日采集患者血液并进行2次军团菌血清抗体检测, 抗体滴度依次为1∶ 400和1∶ 100, 均为阳性。

3.2 军团菌培养和菌株血清、生化试验

3.2.1 培养及生长特征 采集病例肺泡灌洗液标本经GVPC平板和BCYE-α 平板37℃, 5%CO2培养4~7 d, 见可疑菌落, 呈细小或小灰白色、圆形、凸起、光滑、挑之有黏性, 镜检为G— 短杆菌; 该可疑菌落用血平板和BCYE-cys平板进行验证实验, 结果符合军菌菌培养特性。

3.2.2 生化试验 该菌株生化反应结果:触酶、氧化酶试验阳性; 葡萄糖、尿素、硝酸盐还原、马尿酸水解试验阴性; 明胶不液化。

3.2.3 血清分型 将可疑菌株纯培养物进行乳胶凝集试验, 结果嗜肺军团菌LP1、LP2~14乳胶凝集阴性, 非嗜肺军团菌乳胶凝集阳性; 可疑菌株与米克戴德军团菌诊断血清产生凝集, 与生理盐水凝集阴性。玻片凝集试验显示与米克戴德军团菌血清凝集, 与其它非嗜肺军团菌血清不凝集。

3.3 PCR鉴定 提取分离菌株的 DNA 进行 PCR 相关基因检测, 军团菌属特异性基因16S rRNA为阳性, 嗜肺军团菌特异性基因 mip 为阴性。
4 讨 论

军团菌可吸附于中央空调系统、冷却塔、淋浴设施使用过程中产生的气溶胶, 易感人群经暴露吸入后可致病。目前已知的军团菌属有58个种70多个血清型, 80%以上的军团菌病爆发流行由嗜肺军团菌引起。嗜肺军团菌有16个血清型, 血清型Ⅰ 型是临床常见分离株。自1976年美国费城首次出现军团菌爆发病例以来, 在欧洲、澳大利亚等不同国家和地区相继发现。1982年我国南京、北京和上海相继出现该病感染病例[4]。福建省也于上世纪80年代和2007年报道过3例, 均由嗜肺军团菌引起[5, 6]。本报告病例发生在军团菌病高发的夏秋季, 根据军团病诊断标准[1], 结合流行病学史、临床表现(重症肺炎)、胸片和CT检查、患者两份血清军团菌抗体呈阳性, 肺泡灌洗液军团菌培养及PCR试验阳性结果可以确诊为军团菌病。本次分离得到的血清型为非嗜肺的米克戴德血清型(L. micdadei), 这也是我省首次从病人体内分离到该血清型, 在全国范围内也较为罕见。

追溯患者的流行病学史, 可发现本病例以IgA肾病的初始症状入院, 经免疫抑制和激素冲击治疗后免疫功能降低, 出现发热、咳痰和肺部感染, 这可能是导致军团菌条件致病的主要原因。故临床医师对类似患有基础性疾病、器官移植或免疫抑制和激素治疗后肺部出现感染的病例应予以高度重视, 对未能探明病因的发热应尽早进行军团菌的相关检测, 以免贻误病情。

红霉素曾作为治疗军团菌的首选药物, 但20世纪90年代红霉素逐渐被大环内酯类和氟喹诺酮类药物取代, 成为治疗军团菌的推荐药物, 具有良好的细胞渗透活性。美国一项研究发现与大环内酯类(红霉素和克拉霉素)相比, 喹诺酮类具有更好的临床疗效, 主要表现在退热期、并发症和住院时间[7]。非嗜肺军团菌中与人类疾病关系最密切的是米克戴德军团菌, 此种军团菌的临床症状和对抗生素的敏感谱类似于嗜肺军团菌[8]。在本次病例中, 确诊为军团菌病后抗生素调整为拜复乐(莫西沙星), 用药2周后, 肺部症状明显好转, 胸片显示渗出基本吸收。莫西沙星是一种新型的第4代氟喹诺酮类抗生素, 能覆盖社区获得性感染的常见致病菌及肺炎支原体、肺炎衣原体, 具有高效、简单、经济, 耐药性低的特点, 可作为治疗军团菌病的理想用药。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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